よく寄せられる細胞培養に関する質問への回答

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Date:2022-07-14 16:15:00 Thursday

Summary: 1. 凍結細胞のバイアルを受け取った場合、液体窒素で直接保存できますか? 多くの場合、ドライアイス (-80°C) で出荷された細胞は、液体窒素に戻してから急速に解凍できます。しかし、そのような治療は細胞の生存率を低下させる可能性があります。一部の敏感な細胞株では、これにより細胞の回収がより困難になる場合があります。この現象は、温度変化による細胞内の氷晶の構造変化によるものと考えられています。そのため、細胞を受け取ったらできるだけ早く解凍して培養することをお勧めします。 -80°......

1. 凍結細胞のバイアルを受け取った場合、液体窒素で直接保存できますか?
多くの場合、ドライアイス (-80°C) で出荷された細胞は、液体窒素に戻してから急速に解凍できます。しかし、そのような治療は細胞の生存率を低下させる可能性があります。一部の敏感な細胞株では、これにより細胞の回収がより困難になる場合があります。この現象は、温度変化による細胞内の氷晶の構造変化によるものと考えられています。そのため、細胞を受け取ったらできるだけ早く解凍して培養することをお勧めします。 -80°C での保管時間を短縮することをお勧めします。できれば、この温度は出荷時のみに使用してください。

2. 液体窒素タンクでは、細胞を液相ではなく気相で保存する必要があるのはなぜですか?
細胞は液体窒素相で保存され、回収が容易になります。液体窒素の液相では、クライオバイアルが適切に密閉されていないか漏れている場合、細胞は液体窒素と直接接触し、解凍後の細胞の生存率に影響を与えます。

3. 浮遊細胞の培地の交換方法は?
懸濁液中の細胞は、新鮮な培地を追加するだけで (スペースが許せば)、または遠心分離 (100 x g で 5 分間) によって古い培地から細胞を分離し、ペレット化した細胞を新鮮な培地に再懸濁することによって増殖させることができます。ただし、ほとんどの浮遊細胞株では、単に培地を追加する方が優れたアプローチです。どちらの方法でも、細胞が最大飽和密度に達する前に培地をリフレッシュする必要があります。細胞の飽和密度は、細胞株および培養条件 (静止または撹拌、酸素化レベルなど) に応じて、3 x 10 5 から 2 x 10 6 の間です。

細胞を希釈して細胞濃度を下げ、細胞を対数増殖状態に保つのに十分な栄養を回収できるようにする必要があります。細胞密度を下げずに培地を交換しただけでは、細胞はすぐに培地を枯渇させて死んでしまいます。細胞が最小密度未満に希釈されると、遅滞期に入り、増殖が非常に遅くなるか、または死滅します。浮遊細胞株はそれぞれ飽和密度と継代間隔が異なるため、細胞数を毎日測定することが浮遊細胞株をモニタリングする最良の方法です.