汚染後にカラムを洗浄して再生するにはどうすればよいですか？

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Date:2021-11-25 16:42:09 Thursday

Summary: クロマトグラフィーカラムが汚染されている場合、そのクロマトグラフィーの動作は、汚染されていないカラムの動作とは多少異なります。汚染されたカラムは背圧の問題を引き起こす可能性があります。汚染された逆相カラムは、元の動作状態に戻すために洗浄および再生する必要があります。汚染されたHPLCカラムを再生するための鍵は、汚染物質の性質を知り、それを除去するための適切な溶媒を見つけることです。繰り返し注入中に強く保持された物質の蓄積によって汚染が引き起こされた場合、これらの汚染物質を除去す......

クロマトグラフィーカラムが汚染されている場合、そのクロマトグラフィーの動作は、汚染されていないカラムの動作とは多少異なります。汚染されたカラムは背圧の問題を引き起こす可能性があります。汚染された逆相カラムは、元の動作状態に戻すために洗浄および再生する必要があります。
汚染されたHPLCカラムを再生するための鍵は、汚染物質の性質を知り、それを除去するための適切な溶媒を見つけることです。繰り返し注入中に強く保持された物質の蓄積によって汚染が引き起こされた場合、これらの汚染物質を除去する簡単な手順で、クロマトグラフィーの動作を回復できることがよくあります。多くの操作の後、汚染物質を除去するために、クロマトグラフィーカラムを90〜100％の溶媒B（2溶媒逆相システムのより強力な溶媒）で20倍に洗浄することがあります。たとえば、メタノール、アセトニトリル、テトラヒドロフランなどの非水溶媒をカラムの残留脂質に使用できます。

一般的に言って、すべての洗浄方法は同様の形式を持っています。使用する溶剤は、溶剤の強度とともに増加します。多くの場合、最後の溶媒は非常に疎水性であり（酢酸エチルや炭化水素など）、脂質や油などの非極性物質を溶解するために使用できます。一連の溶媒の各溶媒が次の溶媒と混合できることを確認する必要があります。
洗浄プロセスの最後に、中程度の強度の混和性溶剤を使用して元の溶剤システムに戻す必要があります。たとえば、イソプロパノールは、n-ヘキサンまたはジクロロメタン、および水相溶媒と混和するため、中間ステップとして非常に優れた溶媒です。ただし、イソプロパノールの粘度は非常に高いため、過剰なポンプ圧力を回避するために低流量を確保する必要があります。クロマトグラフィーカラムをフラッシングする場合、フラッシング液はクロマトグラフィーカラムの出口端から廃液ボトルに直接接続され、検出セルの汚染を避けるために検出セルを通過することはできません。
逆相クロマトグラフィーカラムは緩衝液を使用しません。次の一連の溶媒を使用して再生してください。
100％メタノール→100％アセトニトリル→75％アセトニトリル-25％イソプロパノール→100％イソプロパノール→100％塩化メチレン→100％n-ヘキサン→100％塩化メチレン→100％イソプロパノール→100％アセトニトリル。
逆相クロマトグラフィーカラムは緩衝液を使用します。次の一連の溶媒を使用して再生してください。
水→アセトニトリル→クロロホルム（またはイソプロパノール）→アセトニトリル→水.